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單純的陰道鏡檢查，一般不會有疼痛感。通過陰道鏡，可以將宮頸、陰道病變的區域放大，再通過醋酸染色和碘染色這兩種方法，使宮頸存在病變的異常血管部位，顯現更加清楚，方便醫生來仔細觀察，是否存在宮頸或陰道病變。陰道鏡檢查本身并不疼痛，可能在醋酸染色時，部分患者可能感覺到輕微刺激，但這種刺激一般是一過性、可以忍受的，而且刺激比較輕微。因此大多數女性，做單純的陰道鏡檢查過程中，其實并沒有痛感。但在陰道鏡下取活檢時，可能產生疼痛感，如果醫生在進行檢查時，感覺宮頸、陰道或外陰區域染色異常，有明顯的可疑病變，此時可能取活檢。活檢需要取下宮頸或者陰道壁上一部分組織，進行組織學檢查，鉗夾取樣過程中可能會產生不適，但大多數女性可以耐受。更多的可能是心理上的恐懼，由于沒有做過相關檢查，存在未知的恐懼。