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陰道鏡檢查通常不會疼痛，即便對于有宮頸糜爛的患者而言可能出現輕度疼痛，也均在耐受范圍內，因此患者不必過于擔心。陰道鏡檢查主要通過肉眼觀察進行診斷，檢查前通常會在患者陰道內涂抹醋酸等藥物使細胞發生變化，在顯微鏡下呈現后可準確判斷是否有病變以及發生病變的位置。患者進行陰道鏡檢查時不會感覺疼痛，但涂抹醋酸可能產生輕微刺激，尤其對于存在宮頸糜爛、宮頸炎癥或宮頸創面的患者而言，醋酸會使其產生燒灼甚至疼痛感。陰道鏡下檢查和治療通常還需進行活檢，宮頸活檢可能會產生一定疼痛，但由于宮頸表面的神經支配較少，即便進行陰道鏡活檢患者也可耐受，因此無需過于擔心。