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慢性化膿性中耳炎常見致病菌有金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、變形桿菌和克雷伯桿菌等。如果病程較長常出現兩種以上細菌混合感染，糖尿病患者或者長期應用抗生素滴耳液患者可以發生真菌感染，還可以有結核桿菌感染等。 在慢性化膿性中耳炎治療中，有時反復感染、流膿不愈的患者，可以取中耳里面的分泌物做培養，判斷患者到底是哪種細菌感染。根據做藥敏試驗，看對哪種藥物更加敏感，這樣可以做到更針對性的殺死細菌治療。