冬蟲夏草是一種真菌，它主要寄生于活動的昆蟲體內進行有機質的分解碳源、氮源和無機鹽內等營養物質。人工栽培時必須合理地配制這類營養成份，才能滿足它的生長要求。現篩選了以下幾種最適宜冬蟲夏草菌絲生長的原料及配方如下：

一、母種制作 培養基配方

1、馬玲薯200克(煮汁)、葡萄糖20克、瓊脂20克、磷酸二氫鉀1克、硫酸鎂1克、蛋白胨1克、牛肉膏0.5克、水1000ml。

2、蛋白胨1克、葡萄糖20克、酵母膏1克、磷酸二氫鉀1克、硫酸鎂1克、VB11克、VB121克、瓊脂20克、 水1000ml。

3、豆芽500克(煮汁)、白糖20克、瓊脂20克、磷酸二氫鉀1克、硫酸鎂1克、蛋白胨0.5克、水1000ml。將上述配方任選一組，按其它母種制作常規方法操作，分裝于180×18試管的1/5，高壓滅菌1.5磅維持30分鐘，制成斜面培養基備用。

接種：待斜面培養基表面余水干后，放入無菌接種箱內接種，將分離的純冬蟲夏草母種挑取黃豆大一塊放入斜面培養基上，每支母種可接10~15支，但母種的傳代不超過二次，否則失去感染力。

培養：接種后，放置15~18℃條件下恒溫培養。三天后菌絲開始萌發，淡黃色而旺盛的絨毛團菌絲向四周蔓廷，七天左右菌絲表面可產生子座(即草)，這種草雖然沒有蟲的寄主，它的營養成份與冬蟲夏草完全一致，正常情況下10天左右菌絲可長滿斜面培養基。

二、液體種制作 培養基配方

1、米湯(大米煮至半熟過濾)500ml、葡萄糖5克、磷酸二氫鉀1克、硫酸鎂1克、蛋白胨1克、牛肉膏1克、 VB11克、VB121克 。

2、面湯(煮面條后的湯)500ml、白糖5克、蛋白胨1克、牛肉膏1克、硫酸鎂1克、酵母膏1克、 磷酸二氫鉀1克 。

3、清泉水500ml、葡萄糖10克、蛋白胨2克、牛肉膏2克、磷酸二氫鉀2克、硫酸鎂2克、 VB12克、VB122克 。 將配好的營養液裝入500ml的三角瓶內，每瓶裝150ml，瓶口塞上棉塞，高壓滅菌1.5磅30分鐘。 接種培養：冷卻后，放入接種箱內無菌操作，將母種培養基取手指頭大一塊放入液體瓶中，每支母種可接5-10瓶，置20~25℃條件下先靜置培養三天，然后再同樣溫度下放入搖床振動培養，若沒有搖床，每天把液體瓶用手搖3-5次，每次3-5分鐘，經過10-15天的培養即成為液體種。 如果栽培量大，液體種不夠的情況下，應根據生產量還可將液體種擴制液體種2-3次(級)，無論哪級液體種都可用于直接栽培冬蟲夏草，但母種或液體種傳代過多會影響效果。液體種不宜存放時間過長，一般在低溫或避光條件下不超過一個月使用效果較好，最好是在栽培季節前制作液體種。

檢驗液體種是否培養成功：

方法是經過10-15天恒溫和振動培養，從色澤上看沒有明顯變化，只有在停止振動三天后，液體表面逐漸出現黃白色菌絲，無任何異色現象，可證明液體種已培養成功，隨著時間長久液體表面形成一層很厚的菌皮，在栽培使用時必須去掉表面這層過厚的菌皮利用清液。

三、固體菌種制作

冬蟲夏草的栽培一般是使用液體菌種，固體菌種還可以試測蟲草子座能否生長，也可以用固體培養基或PDA培養基直接栽出蟲草，它在大米等固體培養基上或桑蠶上都能長出子座，在適宜的昆蟲體上噴入液體種就能長出冬蟲夏草。

培養基配方

1、將大米用水煮至半生過濾，裝入罐頭瓶內，用牛皮紙或塑料薄膜封口滅菌。

2、活玉米或活小麥直接裝入罐頭瓶內(若干品必須浸泡12小時以上)封口滅菌。

3、棉殼95%、米粉3%、黃豆粉2%、含水量60%，裝瓶滅菌。在1.5磅壓力下60分鐘，或常壓滅菌100℃保持5-6小時，冷卻接種。

接種：在接種箱內無菌操作，無論固體母種或液體種都可接入固體培養基。母種可挑取培養基手指頭大一塊放在固體培養基表面，也可以用接種針沾取菌絲在固體培養基中攪拌均勻。液體種接種是將種液滲入固體培養基中搖勻，每瓶用種量不超過5ml。

培養：固體種需在15~18℃的暗光條件下培養，用液體種接的只需15-20天菌絲可長滿瓶，用固體母種接的需要一個月時間菌絲才能長滿瓶。