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腸破裂時如果進行腹腔穿刺，大多數情況可以抽出黃色乳糜樣液體，如果腸穿孔內容物有較多腸內容物甚至大便時，也有可能抽出糞樣物質，甚至伴有異味。在進行腸穿孔診斷過程中，常應用的檢查方法是物理檢查、實驗室檢查以及影像學檢查。物理檢查是常說的望、觸、叩、聽等檢查手段，望診可以看見患者腹式呼吸完全消失，觸診可以摸到患者腹部明顯疼痛，甚至呈木板樣堅硬，聽診可以發現患者腸鳴音完全消失，在這種情況下，要考慮患者出現彌漫性腹膜炎。腸穿孔大多數患者都是以彌漫性腹膜炎的形式表現，這種患者一般會停止排氣、排便，隨著癥狀延長，患者體溫會逐漸升高，白細胞實驗室檢查也會明顯升高。在一些實驗室檢查外，還可以通過影像學檢查，判斷是否出現腸穿孔，尤其是腹部平片、腹部CT等，可以發現在腹腔內出現不明原因的游離氣體，這些手段是判斷腸穿孔的重要標準。